О возможности применения диоспонина в качестве геропротектора
Т.А. Белова, Л.В. Комаров, В.И. Тимонина, В.М. Архарова.
Институт общей генетики АН СССР, Москва; Интернат для престарелых, Московская область, ст. Переделкино.
Сапонины диоскореи Кавказской (диоспонин) обладают антисклеротическим действием, т.е. действием, направленным против одного из основных проявлений старения. Поэтому представлялось правомерным исследовать возможность использования диоспонина для увеличения продолжительности жизни.
Первое поисковое исследование возможности применения диоспонина для увеличения продолжительности жизни проводилось на животных в 1961 г.: на 68 годовалых самках белых крыс (Комаров, 1962). Применялись дозы 8 мг/кг и 40 мг/кг. Раствор препарата вводился per ов в количестве 1 мл. Первая серия из 16 введений была начата в возрасте крыс 384 дней и охватывала 55 дней. После 33-дневного перерыва была проведена вторая серия из 12 введений на протяжении 39 дней. После второго, 54-дневного перерыва была проведена последняя серия из 13 введений на протяжении 46 дней. В ходе эксперимента часть животных по разным причинам была отбракована. Опыт показал, что если в контроле до возраста 800 дней дожило 38% (8 из 21 крысы) исходного числа животных, то из 14 крыс, получавших 8 мг/кг, дожило 10 крыс, т.е. 72% исходного числа, и из 17 крыс, получавших препарат в дозе 40 мг/кг, дожило 9 крыс, т.е. 57% животных.
В дальнейшем была проведена оценка эффективности применения диоспонина по 115 историям болезней и продолжительности жизни умерших пациентов мужского пола одного из домов престарелых. В расчёты были включены все материалы архивных историй болезней, за исключением историй болезней умерших от злокачественных образований. Таким образом, в числе историй болезней, материалы которых вошли в расчеты, находились данные 59 умерших от заболеваний сердечно-сосудистой системы, 39 умерших от заболеваний органов дыхания, 7 умер-них от заболеваний органов пищеварения, 6 - от заболеваний мочеполовой системы и 4 - от прочих заболеваний.
Расчеты производились для лиц, поступивших в интернат в возрасте не моложе 60 лет и проживших в интернате ие менее одного годе. Эти пациенты были разделены на две группы, условно названные нами контрольной и опытной. К опытной группе были отнесены лица, получившие за время пребывания в интернате диоспояии в количестве ие менее 100 таблеток по 0,1 г. В эту группу вошло 40 человек. В среднем ими принималось по 4,2 таблетки в месяц. Максимальное число таблеток диоспонина, принятого одним пациентом, составило 1400 штук, К контрольной группе, состоящей из 75 человек, отнесены лица, совершенно не получавшие диоспоиин, либо получившие его в количестве менее 100 таблеток.
Средняя продолжительность предстоящей жизни для доживших до 60 лет в опытной группе равнялась 277 месяцам, в контрольной груз-пе-214 месяцам. Таким образон, пациенты опытной группы прожили в средней на 63 месяца дольше(Р=0,999). Для доживших до 75 лет средняя продолжительность предстоящей жизни равнялась 112 месяцам в опытной группе (34 человека) и 78 месяцам в контрольной группе(51 человек). Продолжительность жизни в опытной группе была больше на 39 месяцев(Р=0,99).
Отдельно исследовалась эффективность приема диоспонина в сочетании с приеиои аскорбиновой кислоты. В данном случае в контрольную группу, состоящую из 42 пациентов, были включены лица, принимавшие аскорбиновую кислоту не менее 3,5 таблеток в месяц, но не получавшие диоспонина. Средняя продолжительность предстоящей жизни для лиц этой контрольной группы, доживших до 60 лет, разнялась 221 месяцу, а для доживших до 75 лет - 81,6 месяцу.
В группе лиц, принимавших помимо аскорбиновой кислоты диоспонин, средняя продолжительность предстоящей жизни для доживших до 60 лет равнялась 283 месяцам, т.е. на 62 месяца больше, чем в контроле, а для доживших до 75 дет - 123,6 месяцам, т.е. на 42 месяца бсльже, чем в контроле. В обоих случаях различие достоверно (P=0,99 и Р=0,95 соответственно).
Таким образом, результаты проведенных исследований на людях показывают, что применением диоспонина, по-видимому, можно достигнуть некоторого увеличения продолжительности жизни престарелых. Несколько больший эффект, возможно, может быть достигнут при применении диоспонина в сочетании о аскорбиновой кислотой.
Рис. Число месяцев, прожитых жителями Дома ветеранов (Переделкино) сверх контрольного уровня при применении некоторых технологий сдерживания старения - ортомолекулярной и геропротекторной терапии.
В целом, проведенные исследования и на животных, в на людях позволяют полагать, что было бы целесообразно их продолжить на большем материале.
-------
Дискорея ниппонская (DIOSCOREA NIPPONICA MAKINO). Многолетняя травянистая лиана до 4 м длины, семейства диоскорейных (Dioscoreaceae). Произрастает на Дальнем Востоке. Для медицинской промышленности заготавливают корневища растения, из которых производится препарат полиспонин, аналогичный выпускаемому ранее диоспонину.
Химический состав. Корневища диоскореи ниппонской содержат различные органические соединения, однако для медицины основное значение имеют обнаруженные в растении стероидные гликозиды. Содержание их в растении достигает 6-8%. Наиболее важные из них - диосцин, диосгенин и тигогенин.
Фармакологические свойства. Настойка из диоскореи ниппонской и диоскореи кавказской и их стероидные гликозиды довольно хорошо изучены фармакологически. Фармакологическая активность препаратов определяется их антисклеротическими свойствами. Диоспонин, содержащий сумму стероидных гликозидов диоскореи кавказской, в свое время был внедрен в медицинскую практику в качестве активного антисклеротического средства. Однако в связи с истощением промышленных запасов сырья он был заменен препаратом из диоскореи ниппонской - полиспонином.
При помощи экспериментальных исследований было установлено, что диоспонин уменьшает гиперхолестеринемию и отложение липидов в артериальных сосудах, печени, коже и на роговице глаза; увеличивает соотношение лецитин/холестерин, понижает АД, улучшает функцию сердца, расширяет периферические сосуды, увеличивает диурез у кроликов с экспериментальным атеросклерозом.
Полиспонин и диоспонин изучены в сравнительном аспекте. Экспериментальный атеросклероз воспроизводили у кроликов по методу Аничкова в течение 90 дней. Проведены две серии опытов: профилактическая и лечебно-профилактическая.
В конце опыта, на 90-й день введения холестерина и полиспонина, содержание холестерина в крови контрольных животных, получавших только холестерин, было в 3 раза выше, чем в группе животных, получавших холестерин и полиспонин. Содержание лецитина в опытной группе также снижалось примерно в 1 ½-2 раза.
Таким образом, при введении полиспонина понижается содержание холестерина в крови и повышается коэффициент лецитин/холестерин, что способствует удержанию холестерина в состоянии коллоидного раствора и уменьшает возможность отложения его в артериальных сосудах.
У кроликов, которым вводили полиспонин, АД не повышалось. У контрольных кроликов АД повышалось в среднем до 19,3 кПа (145 мм рт. ст.), у них было заметно отложение липидов в коже конечностей (ксантомы) и на роговице глаз («старческая дуга»). У кроликов, которым вводили холестерин и полиспонин, шерсть была гладкая, блестящая, ксантомы на конечностях отсутствовали, «старческая дуга» была едва заметна.
В группах кроликов с выраженным экспериментальным атеросклерозом, леченных полиспонином и диоспонином, по мере снижения уровня холестерина в крови и нормализации коэффициента лецитин/холестерин отмечалось понижение до нормы АД, которое до лечения у них было достаточно высоким.
Полиспонин, так же как и диоспонин, замедляет пульс на 20-40 ударов в минуту, углубляет дыхание, улучшает проведение импульсов к сердцу по блуждающему нерву. Так, при раздражении периферического конца блуждающего нерва после введения полиспонина АД понижается в большей степени, чем до введения препарата. После атропинизации реакция на раздражение блуждающего нерва утрачивается. Это указывает на то, что препарат обладает холиномиметическими свойствами.
При микроскопическом исследовании внутренних органов у контрольных кроликов, получавших только холестерин, наблюдалось диффузное отложение липидов в интиме аорты, особенно в грудном отделе ее. Атеросклеротические изменения были заметны и на полулунных клапанах аорты. Печень имела желтовато-глинистый цвет и была увеличена. Надпочечники также были увеличены. У большинства кроликов, получавших полиспонин и диоспонин, липоидной инфильтрации в артериях не наблюдалось. Внутренние органы у них были без видимых изменений.
В экспериментах установлено, что полиспонин, так же как и диоспонин, тормозит условнорефлекторную деятельность. У животных со слабым типом высшей нервной деятельности тормозящее действие препаратов было более выраженным.
Полиспонин увеличивает суточный диурез у крыс в среднем на 78% (диоспонин-на 74%), не оказывая отрицательного влияния на функцию почек.
При сравнительном изучении влияния полиспонина и диоспо-нина на липидный обмен, развитие экспериментального атеросклероза, АД, пульс, дыхание, диурез и условнорефлекторную деятельность установлено, что стероидные гликозиды, полученные из диоскореи кавказской и диоскореи ниппонской, оказывают аналогичное действие на организм животных
Сапонины диоскореи кавказской и диоскореи ниппонской близки между собой не только по фармакологическим свойствам, но и по токсическим характеристикам. Так, например, максимально переносимая доза полиспонина и диоспонина составляет при подкожном введении для обоих препаратов 100 мг/кг, при внутривенном - 80 мг/кг. Наименьшая токсическая доза для обоих препаратов при подкожном введении составляет 200 мг/кг, а при внутривенном-100 мг/кг. Гемолитический индекс у полиспонина равен 1000, у диоспонина -2000.
Применение в медицине. Клиническое изучение полиспонина было проведено у больных атеросклерозом сосудов головного мозга и сердца, а также при сочетании атеросклероза с гипертонической болезнью. Полиспонин назначали внутрь в таблетках по 0,1 г 2 - 3 раза в день после еды. Курс лечения составлял 20-30 дней. Через 7-10 дней цикл лечения повторяли. У больных атеросклерозом сосудов головного мозга уменьшались или исчезали головная боль, шум в ушах, утомляемость, раздражительность, улучшались настроение, сон, память, нормализовалось АД, понижался уровень холестерина в крови Полиспонин оказался особенно эффективным у больных в начальных стадиях атеросклероза. Препарат не уступает по терапевтической эффективности диоспонину.
Полиспонин также применяли у больных коронарным атеросклерозом, сопровождавшимся стенокардией и гипертонической болезнью. Препарат назначали по 1 таблетке 3 раза в день в течение 20 дней. Другого медикаментозного лечения в период назначения препарата больные не получали, за исключением валидола или нитроглицерина при болях в сердце.
Под влиянием лечения полиспонином у больных значительно понизилось содержание холестерина в сыворотке крови, повысился уровень фосфолипидов в крови, отмечено снижение соотношения холестерин/фосфолипиды, уменьшился синтез β-липопротеидов. Общее содержание белка не изменилось. У больных улучшилось самочувствие, уменьшились частота и продолжительность приступов стенокардии, понизилось систолическое АД в среднем на 2,67-4,00 кПа (20-30 мм рт. ст.), диастолическое - на 1,33 - 2,67 кПа (10-20 мм рт. ст.).
У некоторых больных отмечено улучшение коронарного кровотока по данным электрокардиографического исследования. Повышение сократительной способности миокарда, по-видимому, связано с улучшением коронарного кровотока, однако в большей степени оно обусловлено снижением сопротивления в аорте и других крупных сосудах вследствие уменьшения их липидной инфильтрации.
Таким образом, полиспонин показан при атеросклерозе сосудов головного мозга как в начальных его стадиях (в целях профилактики), так и при выраженных формах заболевания: при атеросклерозе сосудов сердца и при сочетании атеросклероза с гипертонической болезнью
Полиспонин не оказывает побочного действия. Однако в отдельных случаях при длительном приеме больших доз препарата могут появиться кожный зуд, потливость, возможна потеря аппетита. Эти явления исчезают при уменьшении дозы или временной отмене препарата.
Лекарственные формы, способ применения и дозы.
Полиспонин назначают внутрь после еды по 0,1 г 2--3 раза в день в течение 20-30 дней. Через 7-10 дней цикл лечения повторяют. Курс лечения не менее 3 мес. Повторные курсы проводят после 4-6-месячного перерыва. Препарат можно применять как в стационарных, так и в амбулаторных условиях.
Форма выпуска: таблетки по 0,1 г. Препарат относится к списку Б. Хранят его в сухом, защищенном от света месте в герметически закрытых флаконах.
48. «Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия)», С.Я.Соколов, И.П. Замотаев, Москва, «Медицина», 1985 г.
--------------------
Диоскорея кавказская ниппонская
DIOSCOREA CAUCASICA LYPSKY and DIOSCOREA NIPPONICA MACINO
Диоскорея кавказская - многолетняя травянистая лиана до 2,5- 3м высоты, семейства диоскорейных (Dioscoreaceae). Корневище горизонтальное, толстое, длинное. Нижние листья мутовчатые, сердцевидноовальные, верхние очередные или супротивные. Цветки мелкие, однополые, двудомные, невзрачные, в простых пазушных кистях. Цветет в мае - июле, плодоносит в июле - сентябре. Плод - трехгранная трехгнездная коробочка. Семена с крылом, окружающим семя со всех сторон. Диоскорея - эндемичное растение Кавказа, встречается главным образом в западной части Закавказья. Естественные запасы сырья ее весьма ограничены. В корневищах диоскореи кавказской содержится до 10% сапонинов. Сапонины относятся к группе соединений класса гликозидов, где гликозидный гидроксил моно - или олигосахарида замещен каким-либо тритерпеновым или стероидным агликоном. Сапонины при гидролизе распадаются на сахара и агликоны (генины). Агликонами у сапонинов являются тритерпеновые оксикислоты или стероидные соединения. Название сапонины получили от латинскот слова сапо (мыло) по способности повышать поверхностное натяжение воды, образовывать пену. Ввиду ограниченных природных запасов диоскореи приняты меры к культивированию этого растения. Родственное растение диоскорея ниппонская - многолетняя травянистая лиана длиной до 4 м с горизонтальным толстым разветвленным корневищем. Стебли голые, вьющиеся, листья черешковые, семилопастные, в очертании широкосердцевидные 6-12 см длины. Цветки мелкие, однополые, двудомные, в простых или ветвистых пазушных кистях. Плод - почти сидячая трехгнездная коробочка, семена с тонкоперепончатым оттянутым вверх крылом. Цветет в июне - августе, плодоносит в июле - сентябре. Растет по лесным опушкам и кустарникам, реже в широколиственных и смешанных лесах Дальнего Востока. Корневища диоскореи ниппонской содержат до 8% сапонинов. Среди них стероидный сапонин диосцин С27Н42О3-до 0,5- 1,6%. Он нерастворим в воде, гидролизуется на диосгенин, глюкозу и рамнозу. Диосгенин служит в настоящее время основой для синтеза кортизона и других кортикостероидов. В корневищах диоскореи ниппонской обнаружены также крахмал и жирное масло.
Фармакологические свойства
Из диоскореи кавказской были выделены сапонины, основным направлением исследования которых явилось выяснение их влияния на течение атеросклероза.
Сапонины обладают способностью образовывать нерастворимые комплексные соединения с холестерином. По данным Hladovec, сапонин из мыльнянки лекарственной (Saponaria officinalis) понижает содержание липидов в крови у крыс. Griminger и Fisher в опытах на цыплятах и курах с экспериментальной холестеринемией наблюдали понижение содержания холестерина в крови под влиянием сапонина на из люцерны. Механизм антилипемической активности, по-видимому, заключается в том, что сапонины связываются в кишечнике с холестерином, выделяющимся с желчью и кишечным соком или поступающим с пищей. Образующиеся при этом труднорастворимые комплексы не поддаются реабсорбции, в связи, с чем содержание холестерина в крови понижается. Имеются сообщения, что сапонины из мыльного дерева (Sapindus) и гваяка (Guaiak) изменяют дисперсность холестерина плазмы крови, препятствуют его эстерификации и, следовательно, его отложению в стенках сосудов (Tayean, Nivet).
Нами был отмечен факт уменьшения токсичности сапонинов синюхи для кроликов при одновременном введении их с холестерином. Взаимодействие сапонинов с холестерином приводит к образованию труднорастворимых соединений, которые мало всасываются из кишечника, и как следствие-токсичность сапонинов понижается. Имеются сообщения, что сапонины способны соединяться не только с холестерином, но и с белками крови и, по-видимому, могут разрушать белково-липоидный комплекс как основу развития атеросклеротических изменений.
Л. Н. Соколова провела в нашей лаборатории экспериментальное исследование сапонинов диоскореи кавказской при холестериновом атеросклерозе у кроликов. Кроликам контрольной группы вводили холестерин, опытной группы - холестерин и сапонины диоскореи. У животных контрольной группы после 120-дневного введения холестерина его содержание в крови увеличилось с 47-70 до 800-900 мг%, у кроликов, получавших одновременно с холестерином сапонины диоскореи, концентрация холестерина повысилась лишь до 200-470 мг%.
У кроликов контрольной группы постоянным симптомом развивающегося атеросклероза по мере увеличения содержания холестерина в крови являлось повышение артериального давления до 140-170 мм рт. ст. У кроликов, которым вводили холестерин и сапонины диоскореи, артериальное давление оставалось в пределах нормы-120- 130 мм рт. ст. При макроскопическом исследовании внутренних органов у контрольных животных, получавших только холестерин, в интиме аорты наблюдали диффузное отложение липоидов, особенно в дуге и в грудной части аорты. Атеросклеротические изменения были заметны на полулунных клапанах аорты и сосудах почек в виде беловатых нитей. Печень имела желтовато-глинистый цвет, была увеличена в объеме. Надпочечники также были увеличены. У кроликов, получавших холестерин и сапонины диоскореи, изменения в аорте были менее выражены. Наблюдались лишь отдельные мелкие атеросклеротические бляшки, которые располагались главным образом вокруг устьев артерий, отходящих от аорты, а у части животных липидных инфильтраций в интиме аорты совсем не обнаруживалось. Внутренние органы у этих кроликов (печень, почки, надпочечники и др.) были без видимых изменений (В. И. Бичевина).
Электроэнцефалографическое исследование показало, что сапонины диоскореи кавказской (диоспонин) при длительном введении заметно уменьшали число быстрых колебаний и увеличивали число медленных волн и волн с высокой амплитудой и равномерным ритмом, что является показателем повышения тормозных процессов и понижения возбудимости коры мозга. Поведение кроликов также изменялось. Они становились спокойнее. Данные об угнетающем действии на центральную нервную систему сапонинов диоскореи были подтверждены опытами на крысах с выработанными двигательно-пищевыми условными рефлексами. Во всех случаях у животных со слабым типом высшей нервной деятельности сапонины вызывали торможение условнорефлекторной деятельности, которое проявлялось исчезновением условных рефлексов; нередко животные засыпали во время опытов. У крыс с сильным типом высшей нервной деятельности тормозящее действие сапонинов на условные рефлексы было менее выраженным и менее продолжительным.
Исследования , проведенные на мышах, показали, что сапонины усиливают снотворный эффект мединала. Таким образом, сапонины диоскореи оказывают тормозящее действие на центральную нервную систему. Эта особенность сапонинов должна учитываться при рассмотрении механизма их действия на течение атеросклероза, так как известно, что вещества, тормозящие функциональную деятельность центральной нервной системы, понижают холестеринемию и задерживают развитие атеросклероза (А. Л. Мясников). Сапонины диоскореи кавказской увеличивали диурез у крыс, не оказывая повреждающего действия на почки. Сравнительное исследование сапонинов диоскореи кавказской и диоскореи ниппонской показало, что по влиянию на течение экспериментального холестеринового атеросклероза, влиянию на центральную нервную и сердечно-сосудистую системы, на диурез, а также по токсичности они сходны между собой. Поэтому сапонины диоскореи ниппонской предложены для применения в медицине наравне с сапонинами диоскореи кавказской.
Предупреждение развития артериальной гипертензии у кроликов при одновременном введении сапонинов и холестерина, возможно, обусловлено тормозящим влиянием сапонинов на развитие холестеринового атеросклероза, с, одной стороны, и расширением периферических сосудов - с другой (Л. Н. Соколова), которые нельзя исключить, ибо сапонины диоскореи обладают холиномиметическим действием. Дальнейшие исследования механизма тормозящего действия сапонинов на развитие атеросклероза должны быть направлены на изучение этого процесса в биохимическом аспекте. В опытах на наркотизированных кошках водная настойка диоскореи увеличивает объем коронарного кровотока и оказывает кратковременное ацетилхолиноподобное действие. Настойка диоскореи усиливает моторную функцию желудка и возбуждает сокращения изолированного отрезка кишки, при ежедневном введении увеличивает продолжительность жизни мышей, облученных рентгеновскими лучами (В. Я. Легчаев).
Применение в медицине
Сапонины диоскореи кавказской (диоспонин) применяют при общем, церебральном и коронарном атеросклерозе как гипохолестеринемическое средство, в начальных стадиях атеросклероза в целях профилактики, а также при выраженных стадиях заболевания. Препарат назначают по 0,05-0,2 г в таблетках 2 раза в день после еды в течение 10 дней, затем делают перерыв на 3-4 дня и вновь повторяют лечение. Проводят не менее 3-4 курсов. Дозы препарата и длительность лечения могут быть различными и зависят от индивидуальной реакции больных, эффективности препарата и т. п. При положительных результатах лечения у больных улучшается самочувствие и память, восстанавливается ритм сна, больные становятся более спокойными. Одновременно нормализуется содержание холестерина в крови и понижается артериальное давление.
Препараты
Диоспонин (Diosponinum) (Б). Новогаленовый препарат, полученный из измельченных корневищ диоскореи кавказской. Представляет собой порошок желтоватого или светло-кремового цвета, хорошо растворим в воде; водный раствор при встряхивании образует устойчивую пену. Содержит 30-40% сапонинов. При попадании на слизистые оболочки вызывает раздражение. Выпускают в таблетках по 0,1 г. Таблетки в аптеках хранят в банках оранжевого стекла с навинчивающимися крышками с прокладкой из пергамента (препарат гигроскопичен), залитых парафином или мастикой, в сухом темном месте. Срок годности 1 год, после чего производят контроль.
Полиспонин - новогаленовый препарат, полученный из корневищ диоскореи ниппонской, содержит до 40% сапонинов. Было проведено сравнительное изучение диоспонина и полиспонина. По фармакологическим и токсическим характеристикам препараты близки между собой.
Полиспонин назначают по тем же показаниям, что и диоспонин: атеросклероз (общий, церебральный или коронарный), сопровождающийся гипертонией, стенокардией или без них. Дают внутрь по 0,1-0,2 г в таблетках 2-3 раза в день после еды. Лечение проводят циклами по 20-30 дней с 7-10-дневными перерывами. Курс лечения 3-4 мес. Повторные курсы проводят после 4-6-месячного перерыва. По данным клиник, изучавших диоспонин и полиспонин в сравнительном аспекте, препараты в качественном и количественном отношении существенно не различаются между собой. Возможны побочные явления: повышенная потливость, потеря аппетита, катар верхних дыхательных путей, расстройства функции кишечника, кожный зуд. В этих случаях уменьшают дозу или временно отменяют препараты.